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      2. Biochrom30+氨基酸分析儀檢測紅鱱魚中水解氨基酸

        2020-06-28

        摘要:

        以紅鱱魚為原料,使用Biochrom30+全自動氨基酸自動分析儀對其肌肉的氨基酸組成進行分析。結果表明紅鱱魚肌肉中氨基酸總量的質量百分比為16558.3mg/100g,必需氨基酸(不含色氨酸)占氨基酸總量的39.78%,鮮味氨基酸占氨基酸總量的39.09%。

         

        樣品前處理

        1、所用試劑

        1、1  濃鹽酸,濃度≥36%,優級純

        1、2  6mol/L 鹽酸:取500mL 鹽酸加水稀釋至1000mL,混勻。

        1、3  水:去離子水

        1、4  苯酚:須重蒸

        1、5  17種氨基酸標準品

         

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        前處理設備

          1. 分析天平:感量分別為 0.0001g和0.00001g。

          2. 水解管:耐壓螺蓋玻璃試管,體積為25mL

          3. 勻漿機。

          4. 無油真空泵

          5. 干浴水解濃縮儀

          6. 移液管

          7. 0.22um濾膜

         

        樣品制備(參考國標GB 5009.124-2016)

        原料魚手工去除魚鱗、魚皮、魚刺和內臟,采肉后清洗、瀝干,在勻漿機中打成肉糜,于-18℃冰箱中冷凍保存,分析時取出解凍后使用。

         

        試樣水解

        稱取含蛋白7.5-25mg的試樣,加入水解管中,加入15mL 6mol/L鹽酸,繼續向水解管內加入苯酚3滴~4滴。冷凍3min~5min,接到真空泵的抽氣管上,抽真空(接近0Pa),然后充入氮氣,重復抽真空-充入氮氣3次后,在充氮氣狀態下擰緊螺蓋。將水解管放入干浴水解濃縮儀中,110°C水解22-24h,冷卻、混勻、開管、轉移并定容到50ml容量瓶中,用移液管取適量樣液,在干浴水解濃縮儀中50°C吹干,必要時加入少許水,重復吹干1-2次,加入3-5mL PH2.2的稀釋上機用檸檬酸鈉緩沖液溶解,振蕩混勻后,吸取溶液通過0.22μm 濾膜后,轉移至儀器進樣瓶,為樣品測定液,供儀器測定用。

         

        分析方法描述(Biochrom 30+)

        1)     色譜柱:Biochrom Na型陽離子交換樹脂柱,4.6X20cm

        2)     分離程序:

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        3)     運行時間:經分析時間+再生時間 57min

        4)     反應單元溫度:135°C。

        5)     檢測波長:570nm、440nm同時檢測。

         

        附、紅鱱魚分析圖譜及做樣結果

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